Luciferin-ը սովորական կենսալյումինեսցենտ ռեպորտաժ է, որն օգտագործվում է լյուցիֆերազի էքսպրեսիայի վիտրո պատկերման համար: Այս ջրում լուծվող սուբստրատը Firefly luciferase ֆերմենտի համար (սովորաբար Photinus pyralis-ից) օգտագործում է ATP և Mg2+ որպես համագործոններ՝ թթվածնի առկայության դեպքում բնորոշ դեղնականաչավուն արտանետում արձակելու համար::
Ինչ է անում D-Luciferin?
Luciferin-ը սովորական կենսալյումինեսցենտ ռեպորտաժ է, որն օգտագործվում է լյուցիֆերազի արտահայտման in vivo պատկերման համար: Կայծոռային լյուցիֆերազա ֆերմենտի համար ջրում լուծվող այս սուբստրատը օգտագործում է ATP և Mg 2+ որպես կոֆակտորներ՝ թթվածնի առկայության դեպքում բնորոշ դեղնականաչ արտանետում արձակելու համար:, որը անցնում է կարմիր լույսի վրա in vivo 37°C ջերմաստիճանում։
Ի՞նչ է D-Luciferin կալիումը:
Մանրամասներ. D-Luciferin կալիումի աղը օգտակար ենթաշերտ է Firefly Luciferase ֆերմենտի համար: Լուցիֆերազ ֆերմենտի կողմից օքսիդացումից հետո առաջանում է կենսալյումինեսցենտություն: D-Luciferin-ը կարող է օգտագործվել լյուցիֆերազի գենի էքսպրեսիան գնահատելու համար, որը կապված է հետաքրքրություն առաջացնող խթանողի հետ:
Ինչպե՞ս եք պատրաստում D-Luciferin:
1. Պատրաստեք 200X լյուցիֆերինի պաշարային լուծույթ (30 մգ/մլ) ստերիլ ջրի մեջ: Մեղմորեն խառնեք շրջելով, մինչև լյուցիֆերինը լիովին լուծարվի: Անմիջապես օգտագործեք, կամ փոքր չափաբաժիններով և սառեցրեք -20°C-ում հետագա օգտագործման համար:
Ինչպե՞ս եք ներարկում լյուցիֆերինը:
(Լյուցիֆերինը սովորաբար ընդունվում է կամ ներերակային կամ ներերակային:) Օրինակ՝ ներարկել 10 µLԼյուցիֆերինի պաշարային լուծույթ մեկ գրամի մարմնի քաշի համար (սովորաբար ~200 µL 20 գ մկնիկի համար 150 մգ/կգ ստանդարտ ներարկման համար): 5. Սպասեք 10-20 րոպե, նախքան պատկերազարդելը, լյուցիֆերազի ազդանշանի առավելագույն մակարդակը ստանալու համար:
