ԴՆԹ պոլիմերազ-ն ունի սրբագրման ֆունկցիա։
Ի՞նչ ֆերմենտներ են սրբագրում ԴՆԹ-ն:
ԴՆԹ պոլիմերազներ այն ֆերմենտներն են, որոնք բջիջներում կառուցում են ԴՆԹ: ԴՆԹ-ի վերարտադրության (պատճենման) ընթացքում ԴՆԹ պոլիմերազների մեծ մասը կարող է «ստուգել իրենց աշխատանքը» յուրաքանչյուր հիմքի հետ, որն ավելացնում են: Այս գործընթացը կոչվում է սրբագրում: … Պոլիմերազը հայտնաբերում է, որ հիմքերը սխալ են:
Ո՞ր ֆերմենտը գործում է որպես սրբագրիչ ԴՆԹ-ի վերարտադրման ժամանակ:
Էկզոնուկլեազները կարող են գործել որպես սրբագրիչներ ԴՆԹ-ի վերարտադրման ժամանակ ԴՆԹ-ի պոլիմերացման ժամանակ՝ հեռացնելու ԴՆԹ-ի արտասովոր կառուցվածքները, որոնք առաջանում են ԴՆԹ-ի վերարտադրության պատառաքաղի առաջընթացի հետ կապված խնդիրներից, և դրանք կարող են ուղղակիորեն ներգրավվել վերականգնման մեջ: վնասված ԴՆԹ.
Ի՞նչ տեսակի ֆերմենտային ակտիվություն է անհրաժեշտ ԴՆԹ պոլիմերազային սրբագրման համար:
Վերարտադրվող ԴՆԹ պոլիմերազներն ունեն 3' → 5' էկզոնուկլեազային ակտիվություն՝ նվազեցնելու սխալ նուկլեոտիդների սխալ ներածումը վերարտադրության ընթացքում սրբագրման միջոցով:
Կա՞ սրբագրում PCR-ում:
Ստուգող PCR (PR-PCR) մշակվել է 1998 թվականին մուտացիաների հայտնաբերման համար, բայց հազվադեպ է կիրառվումալելների տարբերակման ցածր արդյունավետության պատճառով: Այստեղ մենք մշակեցինք փոփոխված PR-PCR մեթոդ՝ օգտագործելով ddNTP-արգելափակված այբբենարան և ԴՆԹ պոլիմերազների խառնուրդ՝ 3'-5' սրբագրման ֆունկցիայով և առանց դրա:
