Անավը ինկուբացնում ենք սենյակային բարեխառն ջերմաստիճանում 2-3 րոպե : Ամուր կպած բջիջները կարող են արագ անջատվել 37 °C ջերմաստիճանում: Դիտեք բջիջները մանրադիտակի տակ: Անջատված բջիջները մանրադիտակի տակ կլորացված և ճեղքող տեսք ունեն:
Ի՞նչ կպատահի, եթե շատ երկար տրիպսինացնեք բջիջները:
Չափազանց երկար տրիփսինի կոնցենտրացիայով բջիջների ինկուբացիա կվնասի բջջային թաղանթները և կսպանի բջիջները: Եթե վստահ չեք տրիփսինի օգտագործման կոնցենտրացիայի մասին, օգտագործեք ցածր կոնցենտրացիան:
Ինչպե՞ս եք տրիպսինացնում բջիջները:
Բջիջները կարող են կրկին կասեցվել՝ նրբորեն պիպերթարկելով բջիջների կախոցը՝ կուտակումները կոտրելու համար: Անհրաժեշտության դեպքում, բջիջների հաշվարկի և/կամ ենթամշակույթի համար կարող է կատարվել հետագա նոսրացում:
Որքա՞ն ժամանակ է պահանջվում բջիջների միացման համար:
առաջին բջիջները կցվում են արդեն 3-5 րոպե հետո: Իմ փորձով, EC-ների մեծ մասը կցվել է 10-20 րոպե հետո: Բայց որքան երկար եք սպասում, այնքան ավելի ամուր է կցորդը:
Արդյո՞ք վատ է բջիջների տրիպսինացումը երկու օր անընդմեջ:
Այո, դա վնասակար է, եթե դուք անընդհատ տրիպսինացնում եք ձեր բջիջները 24 ժամ բաժանվելուց հետո: Ցանկալի է բաժանումը կատարել 48 ժամ բաժանվելուց հետո: … Դուք կարող եք պահպանել բջիջները այնքան ժամանակ, մինչև մորֆոլոգիան լավ լինի (դա կախված է ձեր բջջի տեսակից, որոշ բջիջներ կարող են հասնել մինչև 80 հատված, իսկ որոշները՝ մինչև 10):