Որքան մեծ է մոլեկուլային քաշը, այնքան երկար է կծիկը և այնքան դանդաղ է ընթանում մոլեկուլը: Այսպիսով, էլեկտրոֆորեզ + SDS բաժանվում է մոլեկուլային քաշի, այլ ոչ թե բնածին լիցքի հիման վրա: Կարևոր նշում. Նույն երկարության սպիտակուցները սովորաբար չեն կարող առանձնացվել գելային էլեկտրոֆորեզով + SDS:
Ինչպե՞ս եք առանձնացնում նույն մոլեկուլային քաշի սպիտակուցները:
Ցենտրիֆուգացումը, էլեկտրոֆորեզը և քրոմատոգրաֆիան սպիտակուցների մաքրման և վերլուծության ամենատարածված մեթոդներն են: Ցենտրիֆուգացիան բաժանում է սպիտակուցները՝ ելնելով դրանց նստվածքի արագությունից, որի վրա ազդում է դրանց զանգվածը և ձևը:
Ո՞ր մեթոդներն են բաժանում սպիտակուցները վճարովի:
Սպիտակուցները կարելի է առանձնացնել իրենց զուտ լիցքի հիման վրա իոնափոխանակման քրոմատագրությամբ: Եթե սպիտակուցը զուտ դրական լիցք ունի pH 7-ում, այն սովորաբար կապվում է կարբոքսիլատային խմբեր պարունակող ուլունքների սյունակին, մինչդեռ բացասական լիցքավորված սպիտակուցը՝ ոչ (Նկար 4.4)::
Հետևյալ մեթոդներից ո՞րն է լավագույնս համապատասխանում մոլեկուլային քաշի հիման վրա սպիտակուցներ առանձնացնելու համար:
Քրոմատագրման մեթոդները, որոնք հիմնված են բաժանման վրա, շատ արդյունավետ են մանր մոլեկուլների տարանջատման և որպես ամինաթթուների, ածխաջրերի և ճարպաթթուների նույնականացման համար: Այնուամենայնիվ, հարաբերական քրոմատոգրաֆիաները (այսինքն՝ իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիան) ավելի արդյունավետ են մակրոմոլեկուլների բաժանման համար՝ որպես նուկլեինաթթուներ և սպիտակուցներ:
Ո՞ր տեսակի սյունակքրոմատոգրաֆիան բաժանում է սպիտակուցները մոլեկուլային քաշի հիման վրա:
Գել ֆիլտրացիոն (GF) քրոմատոգրաֆիա բաժանում է սպիտակուցները բացառապես մոլեկուլային չափի հիման վրա: Տարանջատումը ձեռք է բերվում ծակոտկեն մատրիցով, որին մոլեկուլները, ստերիկ պատճառներով, ունեն տարբեր աստիճանի հասանելիություն, այսինքն՝ փոքր մոլեկուլներն ավելի մեծ մուտք ունեն, իսկ ավելի մեծ մոլեկուլները դուրս են մնում մատրիցից:
