Քանի որ ձայնացումը կարող է պոտենցիալ քայքայել սպիտակուցները և դենատուրացնել սպիտակուցի էպիտոպները, մենք հաջորդիվ գնահատեցինք ձայնագրման ազդեցությունը սպիտակուցի ամբողջականության վրա:
Հնարավո՞ր է, որ հնչյունային ազդեցությունը վնասի սպիտակուցներին:
Հանրաճանաչ պատասխաններ (1)
Ստանդարտ սոնիկացման արձանագրություն ավելի շուտ չի կարող առաջացնել սպիտակուցի մասնատում- էներգիան չափազանց ցածր է: Այն նույնիսկ չպետք է առաջացնի դրա այլասերումը։ Այն կարող է դենատուրացված լինել, երբ այն չափազանց երկար եք արտանետում և գերտաքացնում եք նմուշը: Եթե դուք օգտագործում եք նիկելի քրոմատոգրաֆիա, մյուս ժապավենները կարող են պարզապես կեղտոտվել:
Հնարավո՞ր է, արդյոք, ձայնագրումը կոտրել պեպտիդային կապերը:
Ձայնացումը սովորաբար չի կարող քայքայելսպիտակուցի առաջնային կառուցվածքը, քանի որ այդ կառուցվածքը (ամինաթթուների հաջորդականությունը) կառուցված է կովալենտային կապերից, որոնք շատ անգամ ավելի ամուր են, քան ջրածնային կապերը և կարող է ձայնային ախտահանումը: ապահովել այդ կապերը կոտրելու համար անհրաժեշտ էներգիան։
Ձայնագրումը կոտրո՞ւմ է միջուկային թաղանթը:
Ա ցածր էներգիայով կարճ հնչյունավորումը կարող է խաթարելպլազմային թաղանթը առանց կոտրելու չափազանց շատ միտոքոնդրիալ կամ միջուկային թաղանթներ, որոնք առաջանում են տակտ միտոքոնդրիումներում:
Անհրաժեշտ է արդյոք սպիտակուցի արդյունահանման համար ձայնային ախտահանումը:
Լվացող միջոցի լուծարումը (օրինակ՝ SDS), որն անհրաժեշտ է թաղանթային սպիտակուցների մեկուսացման համար, հանգեցնում է լիզատի նման սոսինձի՝ հիմնականում նուկլեինաթթուների պատճառով: Հետևաբար, այս նուկլեինաթթուները խաթարելու համար նման դեպքերում պահանջվում է sonication: Sonication առաջացնում է շատ ջերմություն և լավ չէշատ սպիտակուցներ։