Պե՞տք է հակամարմիններ պտտել:

2024 Հեղինակ: Elizabeth Oswald | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-17 02:49

Երբ հակամարմինը նոսրացնում եք, այն նրբորեն խառնեք՝ միատարր լուծույթ ապահովելու համար: Խորհուրդ ենք տալիս դեմ օգտագործել պտտվող խառնիչ, քանի որ պտտումը կարող է նպաստել հակամարմինների ապաակտիվացմանը:

Կարո՞ղ եք հակամարմինները ցատկել:

Մեր հակամարմիններից շատերի համար -20°C կամ -80°C փոքր չափաբաժիններով սառեցումը պահպանման օպտիմալ պայման է: … Հակամարմինը ստանալուց հետո ցենտրիֆուգեք 10,000 x գ-ով 20 վայրկյան, որպեսզի ներքև քաշեք լուծույթը, որը փակված է սրվակի թելերի մեջ, և մասնաբաժինները տեղափոխեք ցածր սպիտակուցներ կապող միկրոցենտրիֆուգային խողովակների մեջ::

Պե՞տք է Vortex ֆերմենտ?

Մի՛ պտտեք ֆերմենտային ռեակցիաները :Դուք պետք է ֆիզիկապես խառնեք ֆերմենտը ռեակցիայի մեջ, քանի որ ֆերմենտը գոյություն ունի գլիցերինի լուծույթում, որը կնվազի ձեր արձագանքի ստորին հատվածը: Դա արեք՝ զգուշորեն պտտելով վեր ու վար կամ մատներով խողովակը թափահարելով:

Կարո՞ղ եք պտտել սպիտակուցներ:

ՄԻ պտտեցրեք ձեր սպիտակուցը: Բացի այդ, մի՛ արտասանեք եռանդով ձայնագրություն կամ խողովակներ (այն աստիճան, որ ձեր նմուշում պղպջակներ կան): Սպիտակուցները լուծույթում չեն սիրում օդի կամ կտրվածքի սթրես:

Վորտեքսի ֆերմենտներն անվտանգ են:

Որպես հիմնական կանոն, երբեք մի պտտեք լուծույթը, որը պարունակում է կարևոր ակտիվություն ունեցող սպիտակուց (օրինակ՝ ֆերմենտ, հակամարմին):

Գտնվել է 31 առնչվող հարց

Կարո՞ղ եմ Vortex DNTP:

Մի պտտեցրեք PCR խառնուրդ: Վերջին անգամ ռեակցիայի խողովակին ավելացրեք ԴՆԹ պոլիմերազը (Taq): … ԽուսափելPCR արտադրանքի գերբեռնում գելի մեջ; դա կարող է հանգեցնել խաչաձև աղտոտման կամ արդյունքների սխալ մեկնաբանման:

Լավ է արդյոք պտտվող այբբենարանները:

Շատ մի պտտվեք: Բայց դուք կարող եք նրբորեն պտտել 5-10 անգամ՝ ճիշտ խառնելու համար: Այն չէր կոտրի այբբենարանները։

Կարո՞ղ եք պտտեցնել հակամարմիններ:

Երբ հակամարմինը նոսրացնում եք, այն նրբորեն խառնեք՝ միատարր լուծույթ ապահովելու համար: Մենք խորհուրդ ենք տալիս չօգտագործել vortex mixer, քանի որ կարող է նպաստել հակամարմինների ապաակտիվացմանը:

Ո՞րն է տարբերությունը Vortex-ի և ցենտրիֆուգի միջև:

Պորտոքսը տեղային խանգարում է, որն առաջանում է տուրբուլենտ հոսքի պատճառով: … Պտույտի արագությունը ավելի մեծ է պտտման առանցքի մոտ և նվազում է դեպի պտույտի եզրը: Ի տարբերություն հորձանուտի, ցենտրիֆուգը ստեղծում է կենտրոնախույս ուժ, որը ուղղահայաց է պտտման ֆիքսված առանցքին:

Ինչու է Vortex-ը վատ խառնվելու համար:

Անոթի ամբողջ պարունակությունը պտտեցնելը միատեսակության համար խառնելու ամենավատ հնարավոր միջոցն է: Գլանաձև տարայի մեջ պտտվող պտույտը արդյունավետորեն կառաջացնի հեղուկի պինդ մարմնի պտույտ, որը գրեթե չի ապահովում ճառագայթային կամ ուղղահայաց հոսք, որոնք երկուսն էլ անհրաժեշտ են խառնուրդն իրականացնելու համար::

Կարո՞ղ եք պտտեցնել SYBR:

Ես խորհուրդ չեմ տա պտտեցնել SYBR կանաչ գույնը գլխավոր խառնուրդ պատրաստելուց առաջ կամ հետո: Ես հակիրճ պտտեցնում և պտտում եմ հետաքրքրող այբբենարանը, խառնում եմ ընդհանուր մաստեր-միքսը (sybr-ի հետ) ինվերսիայի միջոցով և կատարում արագ պտտում (զարկերակ կամ ավելին): Sybr-ը ավելացնելուց հետո պտտվելը Taq pol-ը վնասելու վտանգ է ներկայացնում:

Կարող եք Vortexբակտերիաներ?

Բակտերիաները մի կաթիլ ջրի մեջ ինքնաբերաբար ձևավորում են երկուղղորդված հորձանուտ, որտեղ բակտերիաները կաթիլների կենտրոնի մոտ լողում են եզրին մոտ լողացող բակտերիաների հակառակ ուղղությամբ: … subtilis բակտերիաները սահմանափակվում են ջրի մի կաթիլով, շատ տարօրինակ բան է տեղի ունենում:

Հնարավո՞ր է պտտեցնել բջիջները:

Բջիջների պտտումը կարող է լավ վնասել դրանք, սակայն պտտվելու հետևանքով վնասված բջիջների վնասի չափը և քանակությունը մեծապես կախված է բջջի տեսակից: … Այնուամենայնիվ, մենք երբեք չենք պտտվում բջիջները, քանի որ մեր հիմնական բջիջը բավականին զգայուն է մեխանիկական սթրեսի նկատմամբ:

Ի՞նչ կպատահի, եթե սառեցնեք հակամարմինները:

Կրկնվող սառեցման/հալման ցիկլերը վնասում են հակամարմիններին [4]: Այնուամենայնիվ, կարևոր է, որ պահպանված պոլիկլոնալ հակամարմինները պետք է լինեն բարձր կոնցենտրացիայի մեջ: Մոնոկլոնալ հակամարմինները կարող են պահվել -20°C ջերմաստիճանում 50% գլիցերինով:

Ինչպե՞ս եք պահպանում հակամարմինները:

Հակամարմինները սպիտակուցներ են և պետք է պահվեն սառը (սառնարանում, սառույցի վրա կամ սառեցված) երբ չեն օգտագործվում: գ. Որքան ավելի նոսրացած է հակամարմինը, այնքան քիչ կայուն է: Հետևաբար, լավ գաղափար է հակամարմինները պահել խտացված ձևով՝ առանց նոսրացման։

Կարո՞ղ եմ սառեցնել հակամարմինները:

Սառեցման/հալեցման կրկնվող ցիկլերը կարող են դեֆորմացիայի ենթարկել հակամարմինը՝ առաջացնելով այն ձևավորելով ագրեգատներ, որոնք նվազեցնում են հակամարմինների կապող կարողությունը: Պահպանումը -20°C պետք է հարմար լինի հակամարմինների մեծ մասի համար; -80°C-ում պահելու նկատելի առավելություն չկա:

Ի՞նչ է Vortexing-ը:

Վորտեքսը է, երբ պոմպը սկսում է օդ հանել հեղուկի մակերեսից,հեղուկի վերին մասում տեսանելի հորձանուտ ձևավորելով: Սա ստեղծում է օդի և հեղուկի համակցված հոսք, որը մտնում է պոմպ, ինչը հանգեցնում է տուրբուլենտ հոսքի, ինչը հանգեցնում է պոմպի ելքի հոսքի կրճատմանը:

Հնարավո՞ր է ցենտրիֆուգ օգտագործել խառնելու համար:

Percoll®-ի ցենտրիֆուգացումը հանգեցնում է խտության գրադիենտի ինքնաբուխ ձևավորմանը, որը պայմանավորված է միջավայրում մասնիկների չափսերի տարասեռությամբ: Percoll®-ը կարող է օգտագործվել գրադիենտների ձևավորման համար կամ սովորական գրադիենտ խառնիչների օգտագործմամբ կամ բարձր արագությամբ ցենտրիֆուգմամբ:

Պե՞տք է արդյոք մոնոկլոնալ հակամարմինները սառնարանում պահել:

Հակամարմինների մեծ մասը բավականին ամուր է և պետք է պահպանի ֆունկցիոնալ ակտիվությունը, եթե պահվի սառնարանում 2-8oC մինչև 12 ամիս: Երկարատև պահպանման համար խորհուրդ է տրվում սառեցված նյութը պահել փոքր չափաբաժիններով: Խուսափեք սառեցման և հալման կրկնվող ցիկլերից, որոնք բացասաբար կանդրադառնան նյութի վրա:

Որքա՞ն ժամանակ կարող են հակամարմինները մնալ սենյակային ջերմաստիճանում:

Քանի որ նոր հակամարմին է ստեղծվել, Բջջային ազդանշանային տեխնոլոգիայի (CST) գիտնականները փորձարկում են հակամարմինների կայունությունը և ակտիվությունը ավելի քան 7 օր պահպանման ժամկետից հետո -20°C, ժամը սենյակային ջերմաստիճանում և 37°C: Ստուգված բոլոր հակամարմինները նույնքան ակտիվ և կայուն են, երբ պահվում են սենյակային ջերմաստիճանում, ինչպես սառույցի վրա:

Արդյո՞ք հակամարմինները կարող են պահվել:

Շատ դեպքերում հակամարմինները կարող են պահվել -20 °C-ում առանց իրենց կապող կարողության կորստի: Լավագույնն այն է, որ խուսափեք հակամարմինները ցրտից զերծ սառնարանում պահելուց:

Կարո՞ղ եք պտտեցնել օլիգոնուկլեոտիդները:

Ամենաշատօլիգոները համեմատաբար հեշտ են վերակասեցնել; Այնուամենայնիվ, ֆտորոֆորներով կամ հիդրոֆոբ մոլեկուլներով փոփոխվածները կարող են ավելի շատ ժամանակ պահանջել ամբողջովին լուծվելու համար: … Եթե վերակաղմումը դժվար է, փորձեք օլիգոն տաքացնել 55°C ջերմաստիճանում 1–5 րոպե, այնուհետև մանրակրկիտ պտտվել:

Կարո՞ղ եք պտտեցնել պլազմիդային ԴՆԹ:

Ձեր պլազմիդի պտտում և պտտում - հանգստացեք !ԴՆԹ-ի մեխանիկական կտրվածքի հետևանքով կարող է առաջանալ խզված կամ գծային ԴՆԹ, եթե պատրաստուկները պտտվում են կամ շատ ուժեղ թափահարում: պլազմիդի մեկուսացման ժամանակ։ Այնպես որ, շատ հանգիստ վերցրեք; նրբորեն խառնել, մի՛ խառնեք և մի՛ փափկեցրեք փափուկ և խնայողաբար:

Ի՞նչ է TE բուֆերը:

TE բուֆեր, 1X, մոլեկուլային աստիճան (pH 8.0), բուֆեր է, որը կազմված է 10մՄ տրիս-HCl-ից, որը պարունակում է 1mM EDTA•Na₂. Հատկություններ՝ pH 25°C-ում՝ 7,9–8,1։