Շատ կարևոր է տեղյակ լինել, որ western blot-ով ստացված տվյալները սովորաբար համարվում են կիսաքանակական: Դա պայմանավորված է նրանով, որ այն ապահովում է սպիտակուցի մակարդակների հարաբերական համեմատություն, բայց ոչ քանակի բացարձակ չափում:
Վեսթերն բլոտը որակակա՞ն է, թե՞ քանակական:
Western blot-ը հուսալի քանակական մեթոդ է միայն այն դեպքում, եթե հաշվի առնվեն նմուշի հատկությունները և ամբողջականությունը, թիրախային սպիտակուցի նկատմամբ հակամարմինների առանձնահատկությունը և բեռնման արձանագրությունները: Մանրամասների վրա ուշադիր ուշադրություն դարձնելով՝ դուք կարող եք խուսափել սովորական սխալներից և խուսափել Western blot-ի տվյալները սխալ մեկնաբանելուց:
Ի՞նչ տեսակի մեթոդ է western blot-ը:
Վեսթերն բլոտը լաբորատոր մեթոդ է, որն օգտագործվում է սպիտակուցի հատուկ մոլեկուլները հայտնաբերելու համար սպիտակուցների խառնուրդից: Այս խառնուրդը կարող է ներառել բոլոր այն սպիտակուցները, որոնք կապված են որոշակի հյուսվածքի կամ բջիջի տեսակի հետ:
Կարո՞ղ է վեսթերն բլոտը քանակականացնել:
Վեսթերն բլոտները հայտնաբերվում են թիրախային սպիտակուցին հատուկ հակամարմիններով, որոնք հայտնի են որպես առաջնային հակամարմիններ: … Այնուամենայնիվ, հնարավոր է նաև օգտագործել Western blotting՝ նմուշներում սպիտակուցների ճշգրիտ քանակականացում ապահովելու, սպիտակուցների արտահայտման մակարդակի փոփոխությունները գնահատելու համար (2):
Կարո՞ղ է արդյոք Western blot-ը քանակականացնել սպիտակուցները:
Բջիջների լիզումից հետո կարևոր է որոշել նմուշի ընդհանուր սպիտակուցի կոնցենտրացիան: Նմուշի ճշգրիտ քանակությունը թույլ կտա բեռնել այնպատշաճ քանակությամբ սպիտակուցներ յուրաքանչյուր գծում:
