Սահմանափակման մարսողության արտադրանքը կարելի է հեշտությամբ պահել -ի -20 C-ում: 4 C-ում լավ կլինի, բայց ապահովելու համար, որ ակտիվություն և աստղային ակտիվություն չկա: խորհուրդ է տրվում պահել -20 C։
Ինչպե՞ս եք պահում մարսված ԴՆԹ-ն:
Փորձեք գելի կտորը պահել սառնարանում ամբողջ գիշեր, կամ նույնիսկ կտորը հալեցնել բուֆերի մեջ և սառեցնել այն -20°C կամ -80°C ջերմաստիճանում: ԴՆԹ-ի քայքայումը տեղի կունենա նույն արագությամբ և նույն պայմաններում, ինչ լուծվող ԴՆԹ-ն, այնպես որ ավելի երկար պահպանման համար օգտագործեք ավելի ցուրտ ջերմաստիճան:
Ի՞նչ է նշանակում, որ պլազմիդը մարսվում է:
Մաքուր պլազմիդային ԴՆԹ-ն մարսվում է 1 կամ ավելի սահմանափակող ֆերմենտներով (REs) ընտրված՝ տալով ԴՆԹ-ի հստակ տիրույթ, որը հեշտությամբ լուծվում է էլեկտրոֆորեզի միջոցով: … Սովորաբար ընտրվում են սահմանափակող ֆերմենտներ, որոնք կտրում են բազմակի կլոնավորման տեղամասում (MCS) և հանգեցնում 2-5 հեշտ լուծվող գոտիների ախտորոշման օրինակին:
Ինչպե՞ս եք պահում գծային պլազմիդները:
Եթե ձեզ անհանգստացնում է TE-ի ներհոսքի հետևանքով ազդեցությունները, պահեք ԴՆԹ-ն ավելի բարձր կոնցենտրացիայի մեջ և անհրաժեշտության դեպքում նոսրացրեք, կամ օգտագործեք «ցածր TE», որը 10 մՄ Tris/ է: 0,1 մՄ EDTA: երբ ԴՆԹ-ն կամ ՌՆԹ-ն մաքուր են, այն կարող է պահպանվել -20C ջերմաստիճանում շատ ամիսներ առանց որևէ քայքայման:
Որքա՞ն ժամանակ կարող եք պահպանել սահմանափակումների մարսողությունը:
Pro-Tip Կախված կիրառությունից և ռեակցիայի մեջ ԴՆԹ-ի քանակից, ինկուբացիոն ժամանակը կարող է տատանվել 45 րոպեից մինչև գիշեր:Ախտորոշիչ մարսողության համար 1-2 ժամըհաճախ բավարար է: Կլոնավորման համար օգտագործվող >1 մկգ ԴՆԹ-ով մարսումների համար խորհուրդ է տրվում մարսել առնվազն 4 ժամ:
