ՊՇՌ-ի միջոցով ԴՆԹ-ի մի հատվածն ուժեղացնելու համար նմուշը նախ տաքացվում է, որպեսզի ԴՆԹ-ն դենատուրավի կամ բաժանվի միաշղթա ԴՆԹ-ի երկու կտորների: Այնուհետև, «Taq պոլիմերազա» կոչվող ֆերմենտը սինթեզում է - ստեղծում է ԴՆԹ-ի երկու նոր շղթաներ՝ օգտագործելով սկզբնական շղթաները որպես ձևանմուշներ::
Ի՞նչ է տեղի ունենում PCR ուժեղացման ժամանակ:
Ամպլիֆիկացումն իրականացվում է մի շարք երեք քայլերի միջոցով. (1) դենատուրացիա, որի դեպքում երկշղթա ԴՆԹ կաղապարները տաքացվում են՝ շղթաները բաժանելու համար; (2) կռում, որի ժամանակ ԴՆԹ-ի կարճ մոլեկուլները, որոնք կոչվում են պրայմերներ, կապվում են թիրախ ԴՆԹ-ի կողային հատվածներին. և (3) ընդլայնում, որի դեպքում ԴՆԹ պոլիմերազը տարածում է յուրաքանչյուր … 3' վերջը
ՊՇՌ օգտագործվում է ուժեղացման համար:
PCR-ն օգտագործվում է մոլեկուլային կենսաբանության մեջ ԴՆԹ-ի փոքր հատվածների բազմաթիվ պատճեններ պատրաստելու (ուժեղացնելու) համար? կամ գեն ?. PCR-ի միջոցով հնարավոր է ստեղծել ԴՆԹ-ի որոշակի հատվածի հազարավորից միլիոնավոր պատճեններ շատ փոքր քանակությամբ ԴՆԹ-ից: PCR-ը սովորական գործիք է, որն օգտագործվում է բժշկական և կենսաբանական հետազոտությունների լաբորատորիաներում:
PCR գենը ուժեղացվա՞ծ է:
Օգտագործելով PCR-ը, ԴՆԹ-ի հաջորդականությունը կարող է ուժեղացվել միլիոնավոր կամ միլիարդավոր անգամներ՝ արտադրելով բավականաչափ ԴՆԹ պատճեններ՝ այլ մեթոդների կիրառմամբ վերլուծվելու համար: Օրինակ, PCR-ը օգտագործվում է գենետիկական խանգարումների հետ կապված գեների ուժեղացման համար՝հիվանդների ԴՆԹ-ից (կամ պտղի ԴՆԹ-ից՝ նախածննդյան թեստավորման դեպքում):
Ինչ ենPCR ուժեղացման 4 քայլ:
ՊՇՌ-ի քայլերի բացատրություն
- Քայլ 1 - Դենատուրացիա: Խողովակի մեջ պարունակվող լուծույթը ջեռուցվում է մինչև 94°C (201,2°F) ջերմային ցիկլերի միջոցով: …
- Քայլ 2 - Հալեցում: …
- Քայլ 3 - Ընդլայնում: …
- Քայլ 4 - վերլուծություն էլեկտրոֆորեզով:
