Դենսիտոմետրիայի տվյալները, որոնք ստեղծվել են Western blots-ի համար, սովորաբար օգտագործվում են՝ համեմատելու սպիտակուցների առատությունը նմուշների միջև: … Ոչ գծային դենսիտոմետրիայի տվյալներ են նկատվել, երբ Western blots են հայտնաբերվել ինֆրակարմիր ֆլուորեսցենցիայի կամ քիմիլյումինեսցենտության միջոցով և տարբեր SDS-PAGE պայմաններում:
Ի՞նչ է դենսիտոմետրիկ անալիզը:
Դենսիտոմետրիան օպտիկական խտության քանակական չափումն է լուսազգայուն նյութերում, ինչպիսիք են լուսանկարչական թուղթը կամ լուսանկարչական թաղանթը, լույսի ազդեցության պատճառով:
Ինչպե՞ս եք օգտագործում դենսիտոմետրիան Image J-ում:
Դենսիտոմետրիա՝ օգտագործելով ImageJ
- Սեղմեք հրապարակի կենտրոնը և քաշեք այն դեպի հաջորդ գոտի: …
- Վերջին գծի համար կրկնեք ընթացակարգը, բայց սեղմեք Ctrl և 3՝ վերջին գոտին սահմանելու համար: …
- Օգտագործեք գծի գործիքը՝ գծերը գծելու համար՝ հաշվարկներից գծի ֆոնը վերացնելու համար: …
- Գնացեք՝ Analyse→Gels→Label Peaks հաշվետվությունը ստանալու համար:
Ինչպե՞ս եք վերլուծում western blot արդյունքները:
Վավերացրեք ձեր քանակական գործիքները :Օրինակ, կատարեք բլոտ, որտեղ ուղիները բեռնված են 20 մկգ, 15 մկգ և 10 մկգ ընդհանուր սպիտակուցով: Վերլուծությունից հետո թիրախային գոտիների հարաբերական քանակությունը պետք է լինի 2, 1,5 և 1: Փորձեք տարբեր քանակական գործիքներ և կարգավորումներ, մինչև որ կարողանաք հուսալիորեն վերարտադրել ճիշտ արդյունքները:
Ինչպե՞ս եք չափում վեսթերն բլոտը:
Քայլ 1. Որոշեք ֆոնային հանվածըձեր հետաքրքրության սպիտակուցի (PI) խտությունը և նորմալացնող հսկողությունը (NC): Քայլ 2. Որոշեք NC-ն, որն ունի ամենաբարձր խտության արժեքը: Քայլ 3. NC-ի բոլոր արժեքները բաժանեք ամենաբարձր NC խտության արժեքին, որպեսզի ստանաք հարաբերական NC արժեք:
